臺式空氣浴搖床的振幅和轉(zhuǎn)速都會影響培養(yǎng)基中的氧氣傳遞效率OTR。氧氣傳遞效率是指氧氣從大氣中傳入到液體中的效率。OTR數(shù)值越高,氧傳遞效率越高。混合效果越好,氧傳遞速率(OTR)就越好。當然很多科研人員也會用溶氧量這個數(shù)據(jù)來解釋。一般來說,振幅大,轉(zhuǎn)速快,OTR和溶氧效率都會高。轉(zhuǎn)速振幅的高低對于耗氧量大的菌,受溶氧影響大的菌株影響十分明顯。像做檸檬酸發(fā)酵等需氧量大時實驗,轉(zhuǎn)速過低會導致活菌數(shù)目大大減少的。還是在《毒力菌株發(fā)酵時間的優(yōu)化實驗》中對恒溫搖床轉(zhuǎn)速設置4個梯度來研宄對菌株B.HLJ-37的影響,分別在轉(zhuǎn)速為0、100、200、250r/min時,進行單因素對發(fā)酵的影響試驗。試驗結(jié)果顯示:細胞搖床轉(zhuǎn)速對發(fā)酵產(chǎn)生的活芽孢數(shù)以及活菌數(shù)也有著十分顯著的影響。發(fā)酵結(jié)束后,測定細胞搖床轉(zhuǎn)速為200r/min時,菌液中活芽孢數(shù)已經(jīng)達到9.;05X108CFU/mL,而細胞搖床轉(zhuǎn)速為0、100、250r/min的菌液中活芽孢數(shù)僅為9.31X107、3.37X108、6.32Xl08CTU/mL。測定細胞搖床轉(zhuǎn)速為200r/min時,菌液中活菌數(shù)已經(jīng)達到3.01X109CFU/mL,而搖床轉(zhuǎn)速為0、100、250r/min的菌液中活菌數(shù)僅為1.63X108、2.33X109、2.17X109CFU/mL。所以,可以得出搖床轉(zhuǎn)影響菌體生長、導致芽孢數(shù)和晶體蛋白產(chǎn)量下降,致使菌株毒力降低。
振幅的影響
振幅是指搖床托盤在做圓周運動時的直徑,也稱為振蕩直徑或軌道直徑。根據(jù)上海博奧思生物技術(shù)有限公司提供的資料,振幅的選擇與氧氣傳遞效率(OTR)密切相關(guān)。OTR是指氧氣從大氣中傳入到液體中的效率,振幅越大,混合效果越好,從而提高OTR。例如,Infors提供的搖床振幅有3mm、25mm和50mm三種規(guī)格,其中25mm振幅可作為多功能振幅應用于培養(yǎng),是多數(shù)搖床的標準配置。
在細菌、酵母和真菌培養(yǎng)中,由于搖瓶中的氧氣傳遞效率遠低于生物反應器,因此選擇合適的振幅對氧傳遞尤為重要。對于錐形培養(yǎng)瓶的大小,建議25mm振幅應用于25毫升到2升的培養(yǎng)瓶,而50mm振幅適用于2升至5升的培養(yǎng)瓶。
轉(zhuǎn)速的影響
轉(zhuǎn)速,以每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)(rpm)計量,與振幅共同影響氧傳遞速率。在細胞培養(yǎng)中,雖然哺乳動物細胞對氧氣的需求相對較低,但在使用直徑較大的燒瓶時,可以使用50毫米振幅。此外,轉(zhuǎn)速的調(diào)整需要考慮培養(yǎng)物對剪切力的敏感性,高轉(zhuǎn)速可能導致對剪切力敏感的培養(yǎng)物死亡。
振幅與轉(zhuǎn)速的關(guān)聯(lián)
振幅和轉(zhuǎn)速之間存在線性和平方關(guān)系。例如,從25mm振幅增加到50mm振幅(轉(zhuǎn)速相同),離心力增加2倍;而轉(zhuǎn)速提高2倍(振幅相同)時,離心力增加4倍。這種關(guān)系對于實現(xiàn)氧傳遞和混合效果至關(guān)重要。